STA No. 313：用于评估类似或修改的Vitrigel眼刺激性试验方法（以识别不需分类和标签的眼刺激或严重眼损伤化学品）的性能标准

内容提要：

本文件由经济合作与发展组织（OECD）化学品与生物技术委员会发布，属于《测试与评估系列》第313号。文件为评估与TG 494中所述的Vitrigel眼刺激性试验方法（Vitrigel-EIT）在结构、机制和功能上相似或经过修改的试验方法提供了性能标准（PS）。该PS基于OECD第34号指导文件的原则，旨在帮助判定新的“类似”或“修改”方法是否具有足够的科学有效性、可靠性和相关性，可用于识别“不需按联合国全球化学品统一分类和标签制度（GHS）分类为眼刺激或严重眼损伤”的化学品。

性能标准主要包括以下三部分：

1. 基本测试方法组件：规定了类似或修改方法必须包含的已验证参考方法（VRM）的关键要素。VRM的核心是使用人角膜上皮细胞（HCE-T细胞）在胶原Vitrigel膜上构建人角膜上皮模型。该模型应具有约6层活细胞、表面为非角化细胞的组织学结构。关键的检测指标是跨上皮电阻（TEER），通过专用测量系统在暴露于受试物后3分钟内每隔10秒测定一次。根据TEER随时间变化的曲线，提取三个指标：时间延迟（t1）、强度（-[P2-P1]/[t2-t1]）和平台水平（100-P2），并依据预设判定标准（如表1）预测受试物为“刺激物（1/2A/2B类）”或“无类别”。文件详细规定了细胞培养、模型构建、质量控制（TEER值需在140-220 Ω·cm²之间）、对照物质（阴性对照：生理盐水；阳性对照：苯扎氯铵；参考对照：乙醇）以及接受标准（如阴性对照平台水平≤5%，阳性对照平台水平≥40%）。同时明确了适用性限制：pH≤5的化学品，以及log P≥2.5且密度<0.95或>1.10 g/cm³的固体不适用。

2. 最低限度参考化学品清单：列出了20种参考化学品，涵盖GHS第1类（6种）、第2A类（4种）、第2B类（4种）和无类别（6种）。这些化学品代表不同的物理状态、化学类别和有机官能团，并覆盖了体内眼危害的全范围响应。开发者必须使用至少这些化学品来评估新方法的性能。

3. 规定的可靠性和准确性值：要求新方法在至少三个实验室中对20种参考化学品进行测试，每个化学品需进行三次独立实验，每次使用不同批次的角膜模型。性能目标为：实验室内部和实验室间预测一致性均≥90%；灵敏度≥90%、特异性≥50%、准确度≥75%；且不得有任何GHS第1类化学品被多数实验结果低估（即错误预测为无类别）。

该PS为Vitrigel-EIT方法的类似或修改版本提供了标准化的验证框架，有助于推动基于人角膜上皮模型的体外替代方法在眼刺激性测试中的国际认可与监管应用。

STA No. 313：Performance Standards for the Assessment of Proposed Similar or Modified Vitrigel-Eye Irritancy Test Method for Identifing Chemicals not Requiring Classification and Labelling for Eye Irritation or Ser.pdf