STA（OECD，2024）：甲状腺体外方法：甲状腺干扰方法专家组评估报告— 基于 EU-NETVAL 活动的检测方法验证状态评估

内容提要：

本文件由经济合作与发展组织于2024年发布，汇集了甲状腺干扰方法专家组对EU-NETVAL在2017-2022年间开展的17项甲状腺体外检测方法验证状态的系统评估结果。甲状腺功能涉及多种生物学机制，包括TSH受体激活、甲状腺过氧化物酶抑制、碘化酪氨酸生成、甲状腺激素与血清蛋白结合、脱碘酶活性、激素葡萄糖醛酸化代谢、甲状腺激素受体激活以及甲状腺激素应答性细胞增殖等多个分子启动事件。每种检测方法分别由特定的EU-NETVAL实验室开发并提供标准操作程序和验证数据。

评估工作组针对每项方法提出了一套统一的18个问题，涵盖非盲阶段（参照物和对照品的批内/批间变异性、动态范围）、盲法阶段（化学品编码下的重现性、活性判定标准、初步活性分类）以及揭盲后阶段（结果是否符合预期、特异性判断、最高测试浓度建议、平行试验次数）等多个维度。评估结论分为四类：方法已成熟可供后续转移验证（如酪氨酸碘化法、脱碘酶1活性法）；方法有前景但需优化SOP并增加阴性对照后再评估（如甲状腺过氧化物酶-Amplex UltraRed法、ZETA法）；方法性能良好但需要进一步评估生理相关性（如TH葡糖醛酸化抑制法）；方法数据不足以判断验证状态，需更多阳性参照物（如TSH受体cAMP法）。针对甲状腺激素受体激活检测，专家组认为该方法对于激动剂检测有效，但细胞增殖响应缺乏甲状腺特异性。对于TTR结合检测，专家组建议更新SOP中关于荧光干扰的判定标准后进行实验室间转移评估。

该评估报告为后续制定OECD测试指南奠定了科学基础，明确了各项方法的成熟度和待完善方向，同时也识别出一批可用于进一步验证的阳性/阴性参照化学品（如TETRAC、Sobetirone、甲芬那酸、高氯酸盐等）。报告建议，对于有前景的方法，下一步工作应包括向1-2个独立实验室转移方法，采用约10种盲编码化学品进行验证，以证明方法的可转移性和实验室间重现性。

OECD（STA，2024）：Thyroid in Vitro Methods- Assessment Reports by the Thyroid Disruption Methods Expert Group.pdf